疑难动物模型

疑难动物模型介绍

疑难动物模型在多个领域都有着重要的应用

在心血管疾病研究中的应用

1.心力衰竭：创建心肌梗死的动物模型，观察心脏重构和心力衰竭的发展过程，评估药物或治疗手段对心脏功能恢复的影响。

2.心律失常：通过基因编辑或药物诱导，产生心律失常的动物模型，深入研究心律失常的发生机制和寻找有效的治疗靶点。

在神经系统疾病研究中的应用

1.帕金森病：通过使用特定的毒素损伤动物的多巴胺能神经元，模拟帕金森病患者的运动障碍和神经退行性变化，有助于研究疾病的进展机制和测试潜在的治疗方法，如神经保护药物或细胞替代疗法。

2.阿尔茨海默病：构建转基因动物模型，表达与人类阿尔茨海默病相关的基因突变，以研究淀粉样蛋白沉积、tau 蛋白过度磷酸化等病理过程，为新药研发提供基础。

在代谢性疾病研究中的应用

1.糖尿病：例如，通过破坏胰岛β细胞或诱导胰岛素抵抗，建立糖尿病动物模型，研究糖尿病并发症的发生发展，以及评估新的降糖药物和治疗策略。

2.肥胖症：利用基因改造或高热量饮食诱导的肥胖动物模型，探讨肥胖相关的代谢紊乱机制和潜在的治疗途径。

在传染病研究中的应用

1.艾滋病：构建携带人类免疫缺陷病毒（HIV）相关基因的动物模型，研究病毒的感染机制、免疫反应和药物疗效。

2.结核病：使用特定的病原体感染动物，模拟结核病的发病过程，评估疫苗和抗结核药物的效果。

在眼科疾病研究中的应用

1.青光眼：通过升高眼压或破坏视神经等方法建立青光眼动物模型，研究视神经损伤和视网膜神经节细胞凋亡的机制，以及测试新的治疗药物和神经保护策略。

2.黄斑变性：利用基因编辑技术创建与黄斑变性相关的动物模型，探索疾病的病理生理过程和治疗方法。

列举几种实验动物模型造模

白血病动物模型

用免疫耐受性强的人类胎儿骨片植入重症联合免疫缺陷病(SCID)小鼠皮下，出于人类造血细胞与造血微环境均植入小鼠，建立具有人类造血功能的SCID小鼠模型称为SCID－hu小鼠。再将髓系白血病患者的骨髓细胞植入SCID－hu小鼠皮下的人类胎儿骨片内，植入的髓系白血病细胞选择性生长在SCID－hu小鼠体内的人类造血微环境中，即为人类髓系白血病的小鼠模型。SCID小鼠是由于其scid所致。T、B淋巴细胞功能联合缺陷，这种小鼠能接受人类器官移植物。

造模方法：

(1) SCID-hu小鼠：CB-17 scid/scid 繁殖的近交小鼠(SCID)，6~8周龄时用抗生素处理。在无菌条件下，从19~23 妊娠周龄的胎儿取出股骨和胫骨，剪成5mm×５ mm×l０ mm的骨片，植入SCID小鼠皮下，并从每个胎儿供体制备胸腺细胞用于检测同种异体HLA。

(2) 白血病细胞注射：急性髓性白血病患者骨髓细胞(0.4～2) ×104个活细胞(常用冻存解冻后的细胞)悬浮于含10％胎牛血清的ＲPMＩ1640培养液20 d,用微注射器将细胞悬液直接注射人6~8周前植入SCID-hu小鼠的人胎骨片内。选择移植骨与白血病细胞的供体是HLA同种异型，便于追踪人肋骨移植片中细胞的来源。白血病细胞的体内传代：将已生长有白血病细胞的骨移植片再制备细胞悬液，取(0.5~2)×106个活细胞，注入第2个SCID-hu受体小鼠的移植骨片内。处理小鼠MHC-I(主要组织相容性复合体I类)抗原的单抗，直接与染料荧光素异硫氰化物或藻红蛋白结合，用流式细胞仪将细胞分类并分析细胞来源。

胎骨植入后2～3周时，骨片内有坏死与纤维化，CFU－GM与BFU－E减少，未见造血中心；移植4～5周时，骨片内出现由淋巴系与未成熟的髓系细胞组成的造血中心；6～8周后，植入胎骨片结构与正常胎儿造造血骨髓类似，并能维持正常造血达20周。用MEＭ－43(人类细胞抗原的特异抗体)与Ly5.1(小鼠血细胞的特异抗体)检测，植入骨片的细胞中人类细胞占70％以上，而小鼠细胞仅占5％~20％。胎儿骨片内的人类基质细胞可刺激人的造血干细胞的增殖与分化，以维持正常造血。将人的急性髓性白血病细胞注入SCID-hu小鼠的一块胎骨片内，4~6周后，胎儿骨片内的正常造血细胞被急性白血病细胞的增殖所取代，而且还选择性地转移到植入的其他胎骨片内。

急性呼吸窘迫综合征动物模型

急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是一种以进行性呼吸困难与顽固性低氧血症为特征的急性呼吸衰竭。多发生于原心肺功能正常的患者，由于肺外或肺内的严重疾病引起广泛的肺泡—毛细血管膜的损伤，通透性增加，继发急性高通透性肺水肿和进行性缺氧性Ⅰ型呼吸衰竭。虽病因各异，，临床表现均为急性呼吸窘迫，难治性低氧血症。

血管性痴呆动物模型

一、实验对象：

选用健康Ⅱ级SD雄性大鼠，体重280-320g，动物于安静环境下分笼饲养，室温控制在(22士1)℃的范围内，相对湿度60%，光线自动控制，明(07: 00- 19: 00)暗（19: 00-07）交替，给予充足清洁饮水、摄食。

建模方法：大鼠10%水合氯醛腹腔注射(1g/ kg)麻醉后，将其仰卧固定。分离右颈总动脉（CCA） ,颈内动脉(ICA)及颈外动脉(ECA）并挂线备用，结扎ECA与CCA,用动脉夹夹闭ICA远心端后，迅速于ECA与ICA分义处作一切切口，从切口处插入一端加热成光滑球形尼龙线(直径为0.25 mm,距球端2cm处作标记)。线插入ICA后，于入日处稍稍结扎尼龙线与入口处ICA段，然后松开夹闭ICA的动脉夹，继续插入尼龙线至稍有阻力后略回撤，至线插入深度为(18.5士0. 5)mm左右，实现大脑中动脉阻塞导致脑缺血。再次结扎入口处。缝合皮肤。2h后轻轻提拉所留线头至有阻力，实现大脑中动脉再灌，则造模完成。

动物入选的标准按照Zea Longa 5级评分法取评分为2,3,4分的动物,动物于缺血2h后出现对侧前肢倦曲或行走转圈或行走向对侧倒体征则，动物无此体征或于缺血2h后仍不清醒者弃去。

实验对象：犬、家兔、大鼠

二、建模方法：

1．骨髓提取液所致ARDS

用乙醚提取骨髓液(含甘油三酯、胆固醇，游离脂肪酸)。犬(18～23kg)，以1.4~1.7mg提取液静脉注射，可建立ARDS模型。动物静脉注射骨髓提取液后，立即出现呼吸增快、窘迫、紫绀，双肺满布哮鸣音，约2h出现罗音。光镜检查见肺泡及间质水肿、出血、透明膜形成、急性肺炎、肺不张、肺气肿、嗜酸细胞浸润、血管内及肺间质脂肪栓塞。

2．佛波醇十四酸乙酸所致ARDS

取体重2~4kg健康家兔，常规麻醉，仰卧固定，经耳缘静脉注射PMA(40mg／kg)。急性呼吸窘迫持续4~6h，伴有肺出血，以后进入弥漫性肺间质炎，进而发生肺纤维化。整个病理过程与临床ARDS甚相似，是观察肺纤维化较理想的模型。模型成功复制后，动物出现呼吸增快、窘迫、紫绀，双肺满布哮鸣音。光镜检查见肺泡及间质水肿、出血、透明膜形成。